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酶解雞血球制備抗氧化肽的工藝優(yōu)化和分析鑒定
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 157 發(fā)表時間: 2019-09-26
作者: 鄭召君,張日俊
關(guān)鍵詞: 抗氧化肽|雞血球|響應面|分離純化|結(jié)構(gòu)鑒定
摘要:

為挖掘家禽血液潛在的抗氧化特性,以雞血球為原料,篩選最佳蛋白酶酶解制備抗氧化肽,并對酶解工藝進行響應面優(yōu)化。采用超濾、陽離子交換色譜、凝膠色譜及高效液相色譜對酶解物進行連續(xù)分離純化,并用質(zhì)譜進行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果表明,酸性蛋白酶水解血球蛋白制備的酶解物具有最高的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力(>80%)。其最佳酶解條件為酶用量2%、酶解溫度45?℃、酶解時間3.0?h,該條件下的DPPH自由基清除能力、超氧陰離子自由基清除能力和還原力分別為(98.31±0.66)%、(28.89±0.31)%和1.94±0.03。經(jīng)系列分離純化獲得抗氧化活性最強的組分,其在質(zhì)量濃度為0.1?mg/mL時,DPPH自由基清除能力和還原力分別為(87.16±1.59)%和0.21±0.01。經(jīng)高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)鑒定,目標肽的氨基酸序列為MGQKDSYVGDEAQSKRGILT,分子質(zhì)量為2?182.1?Da。

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