領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
采用乳酸乳球菌表達(dá)載體對(duì)PlnF抗菌肽基因進(jìn)行克隆表達(dá)，旨在使重組乳酸菌可以直接應(yīng)用于食品的發(fā)酵和防腐之中。在乳酸乳球菌pNZ8149/NZ3900表達(dá)載體中，構(gòu)建含有胞外表達(dá)信號(hào)肽的PlnF抗菌肽重組質(zhì)粒，進(jìn)一步在電阻200?Ω、電容25?μF條件下電轉(zhuǎn)入NZ3900感受態(tài)內(nèi)。經(jīng)溴甲酚紫培養(yǎng)基篩選、菌落聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)驗(yàn)證、測(cè)序等鑒定正確的重組菌株，以1?ng/mL?Nisin誘導(dǎo)6?h后離心獲得的上清液對(duì)金黃色葡萄球菌具有（14.03±0.23）mm的抑菌圈，經(jīng)Tricine-十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)到在5.8～7.8?kDa間出現(xiàn)一條與預(yù)期大小相近的條帶，進(jìn)一步通過納升液相色譜-電噴霧-串聯(lián)質(zhì)譜驗(yàn)證表明PlnF蛋白在pNZ8149/NZ3900乳酸乳球菌表達(dá)載體中正確地進(jìn)行了胞外表達(dá)。
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