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馬乳酒樣乳桿菌馬乳酒樣亞種real-time PCR檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用
來(lái)源:導(dǎo)入 閱讀量: 142 發(fā)表時(shí)間: 2024-06-24
作者: 呂厚姣,李欣媛,白小佳,賈龍剛,耿偉濤,王艷萍
關(guān)鍵詞: 馬乳酒樣乳桿菌馬乳酒樣亞種;實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);特異性引物
摘要:

本研究建立了一種特異性實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)檢測(cè)方法,根據(jù)模式菌株馬乳酒樣乳桿菌馬乳酒樣亞種ZW3的16S rDNA序列和全基因組序列設(shè)計(jì)篩選特異性引物,采用SYBR Green I熒光染料建立real-time PCR方法,并對(duì)方法的特異性、靈敏度、重復(fù)性和混合體系等進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明,本研究所建立的方法特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好,建立real-time PCR的標(biāo)準(zhǔn)曲線,其決定系數(shù)R2為0.965,具有良好的線性關(guān)系,且在馬乳酒樣乳桿菌馬乳酒樣亞種及混合體系中可以特異性檢出。綜上,本研究建立的real-time PCR法可以快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)馬乳酒樣乳桿菌馬乳酒樣亞種,為馬乳酒樣乳桿菌的特異性定性定量檢測(cè)提供了一種新的方法。

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