領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
建立依賴(lài)解旋酶恒溫基因擴(kuò)增（helicase-dependent isothermal DNA amplification，HDA）快速檢測(cè)發(fā)酵乳中沙門(mén)氏菌方法。以沙門(mén)氏菌invA基因序列為目的基因，設(shè)計(jì)特異性引物，優(yōu)化反應(yīng)體系中UvrD解旋酶及T4 gp32添加量，建立最優(yōu)反應(yīng)體系。通過(guò)HDA方法直接檢測(cè)發(fā)酵乳中沙門(mén)氏菌，擴(kuò)增其產(chǎn)物后進(jìn)行電泳檢測(cè)，驗(yàn)證方法特異性。結(jié)果表明：采用HDA快速檢測(cè)法檢測(cè)發(fā)酵乳中沙門(mén)氏菌特異性良好，優(yōu)化后反應(yīng)體系體積50 μL時(shí)，UvrD解旋酶添加量為0.10 μg，T4 gp32添加量為5.0 μg，得到與設(shè)計(jì)序列長(zhǎng)度（304 bp）一致的擴(kuò)增產(chǎn)物，檢出限為2.6×102 CFU/g；該方法用于快速檢測(cè)發(fā)酵乳中沙門(mén)氏菌能夠滿(mǎn)足檢測(cè)需求，具有較高的靈敏度、易操作，可作為一種基礎(chǔ)且快速的方法檢測(cè)發(fā)酵乳中沙門(mén)氏菌。
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