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氟蟲腈單克隆抗體的制備及其在牛乳檢測中的應(yīng)用
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 301 發(fā)表時間: 2022-03-23
作者: 張二敬,李玉靜,李紫然,趙 麗,劉靜靜,張 靜,趙寶華,李春生
關(guān)鍵詞: 氟蟲腈;人工完全抗原;單克隆抗體;酶聯(lián)免疫吸附測定;抑制率
摘要:

合成氟蟲腈人工完全抗原,制備氟蟲腈單克隆抗體,以氟蟲腈及氟蟲腈類似物為半抗原,分別采用戊二醛法和碳二亞胺法合成人工完全抗原;利用紫外光譜掃描法、十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳法進(jìn)行鑒定;使用氟蟲腈-牛血清蛋白人工完全抗原免疫BALB/c小鼠,得到雜交瘤細(xì)胞株,采用小鼠體內(nèi)誘生腹水方法制備單克隆抗體;使用酶聯(lián)免疫吸附測定法測定氟蟲腈在牛乳中的加標(biāo)回收率及精密度。結(jié)果表明:氟蟲腈的人工完全抗原合成成功,制備的單克隆抗體3F6質(zhì)量濃度為8.5 mg/mL,效價為2.0×106,亞型為IgG1,與氟甲腈、氟蟲腈砜、氟蟲腈亞砜的交叉反應(yīng)率分別為9.21%、14.02%、21.46%;氟蟲腈在牛乳中的加標(biāo)回收率為87%~118%,變異系數(shù)低于15%,方法具有較高準(zhǔn)確度和精密度。

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