領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
為獲得1 株穩(wěn)定高產(chǎn)的L-苯丙氨酸工程菌株，利用規(guī)律間隔成簇短回文重復(fù)序列/Cas9技術(shù)，在大腸桿菌W3110中引入已解除反饋抑制的分支酸變位酶/預(yù)苯酸脫水酶PheA，隨后利用不同強(qiáng)度的啟動(dòng)子對(duì)莽草酸途徑中各反應(yīng)酶進(jìn)行調(diào)控，并通過(guò)搖瓶發(fā)酵確定了莽草酸途徑各步反應(yīng)酶的最適表達(dá)強(qiáng)度，最后通過(guò)增加前體物磷酸烯醇式丙酮酸供應(yīng)，獲得了1 株性能最佳的L-苯丙氨酸工程菌株P(guān)HE12。利用該菌株進(jìn)行搖瓶發(fā)酵24 h，L-苯丙氨酸產(chǎn)量達(dá)20.5 g/L。利用發(fā)酵罐分批補(bǔ)料發(fā)酵48 h后，L-苯丙氨酸產(chǎn)量達(dá)81.8 g/L，與目前文獻(xiàn)報(bào)道的最高產(chǎn)量相比產(chǎn)量提高了12.2%，生產(chǎn)強(qiáng)度和糖酸轉(zhuǎn)化率（葡萄糖計(jì)）分別為1.7 g/（L·h）和0.24 g/g，工業(yè)前景良好。
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