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利用CRISPRi技術(shù)構(gòu)建乙醛酸生物合成Corynebacterium glutamicum工程菌
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 130 發(fā)表時(shí)間: 2021-01-21
作者: 梁詠思,沈凱佳,范許云,韓武洋,李天明
關(guān)鍵詞: 谷氨酸棒狀桿菌;乙醛酸;規(guī)律間隔成簇短回文重復(fù)序列干擾;工程菌
摘要:

以谷氨酸棒狀桿菌(Corynebacterium glutamicum ATCC 13032)為出發(fā)菌株,敲除其支流代謝關(guān)鍵酶乳酸脫氫酶合成基因lldh,建立規(guī)律間隔成簇短回文重復(fù)序列干擾(clustered regularly interspaced short palindromic repeats interference,CRISPRi)調(diào)控體系,并利用該體系下調(diào)支流代謝中的關(guān)鍵酶異檸檬酸脫氫酶合成基因icd和蘋(píng)果酸合成酶合成基因ms的表達(dá)強(qiáng)度,同時(shí)過(guò)表達(dá)異檸檬酸裂合酶合成基因icl,強(qiáng)化乙醛酸合成的通路。通過(guò)48 h連續(xù)監(jiān)測(cè)工程菌和野生菌生長(zhǎng)狀況,并檢測(cè)發(fā)酵終產(chǎn)物。結(jié)果顯示:工程菌生長(zhǎng)幾乎不受影響,發(fā)酵液中乙醛酸質(zhì)量濃度達(dá)到5 mg/mL,實(shí)現(xiàn)了乙醛酸的積累,為谷氨酸棒狀桿菌工業(yè)生產(chǎn)乙醛研究提供一定的參考。

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