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不對稱PCR技術(shù)結(jié)合免疫層析法快速檢測產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 115 發(fā)表時(shí)間: 2021-01-21
作者: 山珊,黃昭鴻,黃艷梅,劉道峰,劉成偉,黃運(yùn)紅,龍中兒
關(guān)鍵詞: 不對稱聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);免疫層析技術(shù);產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌;檢測
摘要:

產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)可分泌志賀毒素,致病性強(qiáng),建立簡便快速的STEC檢測方法對控制食源性疾病的發(fā)生和蔓延極為重要。使用生物素標(biāo)記STEC的標(biāo)志性毒力基因stx1與stx2的下游引物進(jìn)行不對稱聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),獲得生物素化的目標(biāo)單鏈DNA與聚苯乙烯微球標(biāo)記的目標(biāo)基因的上游引物特異性結(jié)合形成結(jié)合物,結(jié)合物上的生物素因與試紙條檢測線上鏈霉親和素結(jié)合而使檢測線顯色。通過建立的方法可成功快速檢測出攜帶不同毒力基因的STEC,同時(shí)利用該方法對23 株菌株進(jìn)行stx基因的檢測,結(jié)果顯示該方法可準(zhǔn)確檢測到含有STEC標(biāo)志性毒力基因stx的菌株,且表現(xiàn)出良好的特異性。

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