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野油菜黃單胞菌基因組DNA快速提取方法和酶切
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 108 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 劉以祥, 李柏林, 歐杰, 徐明全
關(guān)鍵詞: 野油菜黃單胞菌|基因組DNA|
摘要:

本文建立了一種野油菜黃單胞菌(Xanthomonas campestris)基因組DNA的簡(jiǎn)便快速提取方法。用去污劑SDS和CTAB破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu),使胞內(nèi)核酸釋放,用酚/氯仿/異戊醇去除蛋白質(zhì),經(jīng)異丙醇沉淀DNA,TE溶解DNA。采用此SDS和CTAB結(jié)合的方法提取的DNA瓊脂糖電泳圖譜與試劑盒UNIQ-10提取的基因組DNA及D-5010A試劑盒法提取的基因組DNA圖譜相同,DNA經(jīng)紫外分光光度計(jì)檢測(cè)OD260/OD280在1.80~1.90之間。DNA能被EcoRI、XbalI酶切消化。本方法能快速簡(jiǎn)便地提取野油菜黃單胞菌DNA,提取的DNA含量較高、純度較好,比試劑盒更經(jīng)濟(jì),也可用于酶切分析、構(gòu)建文庫(kù)和PCR擴(kuò)增。

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