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凝乳酶的基因克隆、序列分析及初步表達(dá)
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 122 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 邱重晏, 徐敏, 王正祥
關(guān)鍵詞: 凝乳酶|克隆|序列分析|重組菌|表達(dá)|
摘要:

PCR擴(kuò)增得到微小毛霉凝乳酶結(jié)構(gòu)基因并測(cè)定其核苷酸序列,用DNAman軟件分析其核苷酸序列及推衍得到的多肽序列,結(jié)果表明擴(kuò)增得到的片段為凝乳酶基因。構(gòu)建了重組菌Pichia pastoris KM71/PIC9K-mcp,通過(guò)G418抗性篩選得到具有多拷貝基因的整合重組菌MK3。用甲醇誘導(dǎo)進(jìn)行初步發(fā)酵試驗(yàn),測(cè)得重組菌MK3酶活為5.4U/ml。

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