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兔血清乙酰膽堿酯酶用于農(nóng)藥殘留速測的最佳條件研究
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 153 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 王文祥, 胡美英, 劉萱清, 蒲小明, 鐘國華
關(guān)鍵詞: 農(nóng)藥殘留; 快速檢測; 乙酰膽堿酯酶; 丙硫磷;
摘要:

研究了磷酸緩沖液pH值、反應時間、反應溫度、底物、酶量對兔血清乙酰膽堿酯酶(AChE)活力測定的影響,結(jié)果表明,供試AChE活力最佳條件是:磷酸緩沖液(pH8.0)3.0ml,顯色劑0.6%二硫雙對硝基苯甲酸(DTNB)50μl,0.75%酶液(pH8.0)100μl,反應溫度35℃,混勻穩(wěn)定后加入底物1%碘化硫代乙酰膽堿(BTCI)50μl,反應180s后在412nm處測定光密度。在上述條件下,測定表明有機磷殺蟲劑丙硫磷(Prothiofos)濃度在0.0125~0.4μg/ml,保育時間5~30min之間與AChE抑制率之間存在良好的相關(guān)性,可根據(jù)檢測需要調(diào)整保育抑制時間。本試驗結(jié)果將為應用兔血清AChE研制、改進有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留速測卡,實現(xiàn)農(nóng)產(chǎn)品、食品農(nóng)藥殘留快速檢測提供重要參考。

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