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—— 中國食品雜志社
SYBRGreenI是一種在實(shí)時定量PCR檢測中廣泛使用的DNA結(jié)合染料。PCR結(jié)果可以通過溶解曲線分析來鑒定而不再需要使用傳統(tǒng)的瓊脂糖凝膠電泳來鑒定,因為PCR特定擴(kuò)增產(chǎn)物的溶解溫度的特異性是類似于瓊脂糖凝膠電泳中的擴(kuò)增條帶的特異性。建立了基于擴(kuò)增產(chǎn)物溶解曲線分析的二重實(shí)時定量PCR對轉(zhuǎn)bar和pat基因的作物進(jìn)行檢測的方法。獲得了bar和pat基因的特異性擴(kuò)增產(chǎn)物和他們的特定溶解溫度,并且通過幾組不同的二重PCR對他們的擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行了溶解曲線鑒定。還對影響溶解曲線分析的一些因素進(jìn)行了研究和討論。結(jié)果表明基于擴(kuò)增產(chǎn)物的溶解溫度建立的二重PCR檢測方法是可行的,該方法對轉(zhuǎn)bar和pat基因的作物可達(dá)到0.9%的檢測限。
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