領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
用乳酸菌表達(dá)有藥用價(jià)值的生物學(xué)活性多肽,是當(dāng)前國(guó)際上的研究熱點(diǎn)之一,對(duì)開發(fā)新的功能性食品具有廣闊的前景。本文應(yīng)用PCR方法將人干擾素IFN-α-2b基因與IgGFc基因連接,并引入一段柔性連接肽,構(gòu)建了融合蛋白基因IFN-IgGFc,將融合蛋白基因克隆到原核表達(dá)載體pSC111AE中,轉(zhuǎn)化乳酸乳桿菌ATCC393進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)及鑒定,并研究了融合蛋白的生物學(xué)活性。結(jié)果表明,通過(guò)Western-Blot方法在表達(dá)上清液檢測(cè)出干擾素融合蛋白,ELISA測(cè)定表明兩段多肽能夠保持各自的構(gòu)象,基因工程乳酸菌表達(dá)的上清液可以誘導(dǎo)WISH細(xì)胞產(chǎn)生明顯的抗VSV病毒的活性,其活性為1.71×103IU/ml。本文首次構(gòu)建并在大腸桿菌和乳酸菌表達(dá)了IFN-IgGFc融合蛋白,獲得了能產(chǎn)生人干擾素的乳酸菌株,為基因工程乳酸菌及相關(guān)藥物的開發(fā)研究奠定了基礎(chǔ)。
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