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雞關(guān)節(jié)軟骨Ⅱ型膠原的制備
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 128 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 曹慧, 許時(shí)嬰
關(guān)鍵詞: Ⅱ型膠原; 制備; 雞關(guān)節(jié)軟骨;
摘要:

本文以雞關(guān)節(jié)軟骨為原料制備Ⅱ型膠原。在酸性條件下添加不同濃度的胃蛋白酶酶解雞關(guān)節(jié)軟骨Ⅱ型膠原三股螺旋鏈的端肽,使Ⅱ型膠原由不溶性轉(zhuǎn)變?yōu)榭扇苄?研究底物粘度隨酶解時(shí)間的變化,確定最佳的酶濃度及酶解時(shí)間。采用DEAE-Sephalose CL 6B離子交換柱和去離子水重復(fù)洗滌兩種方法對(duì)酶解樣品進(jìn)行純化制得Ⅱ型膠原,研究表明,胃蛋白酶最適添加濃度1%(W/W),最佳酶解時(shí)間24h。兩種純化方法的Ⅱ型膠原提取率分別為67%和81%。SDS-PAGE電泳、高效液相色譜、氨基酸成分分析及紫外吸收光譜測(cè)定結(jié)果證實(shí)了由雞關(guān)節(jié)軟骨所制備的Ⅱ型膠原具有較高純度。

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