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嗜熱鏈球菌胸苷酸合成酶基因的克隆與序列分析
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 130 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 張艷禾, 朱曉俊, 張?zhí)m威
關(guān)鍵詞: thyA基因; 克隆; 序列分析;
摘要:

本研究以嗜熱鏈球菌(S.thermophilus)染色體DNA為模板,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增出胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,thyA)基因,將其克隆入T載體中,轉(zhuǎn)化DH5α,篩選陽(yáng)性克隆,提取質(zhì)粒,進(jìn)行酶切鑒定,PCR擴(kuò)增鑒定,進(jìn)行測(cè)序,與已知序列進(jìn)行同源性比較,結(jié)果表明成功克隆了thyA基因,全長(zhǎng)900bp,與國(guó)外報(bào)道的S.thermophilus ATCC19258 thyA基因同源性達(dá)99.9%。這為構(gòu)建以thyA基因?yàn)檫x擇壓力的非抗生素抗性載體提供了理論依據(jù)。

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