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大豆、油菜籽及大豆油中外源基因檢測的靈敏度、準(zhǔn)確度研究
來源：食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 141 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 吳姍, 鮑曉霞, 張曉峰, 黎昊雁, 董強(qiáng)
關(guān)鍵詞: 轉(zhuǎn)基因檢測； 靈敏度； 準(zhǔn)確度； 引物； NEST-PCR；
摘要:

本研究針對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品中轉(zhuǎn)入的目的基因以及啟動(dòng)子、終止子,設(shè)計(jì)了相應(yīng)引物35SCP142、CPNOS165。通過對引物的調(diào)整,使PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的大小控制在100～170bp,從而提高了檢測靈敏度。在25μl的PCR反應(yīng)體系中,可以檢測到0.01ng的外源DNA。為了檢測以大豆為原料的油脂類產(chǎn)品中的外源基因,我們又設(shè)計(jì)了NEST-PCR的兩對引物35SCP318和35SCP114,并檢測到了外源基因的片斷。對新設(shè)計(jì)的引物進(jìn)行準(zhǔn)確度分析,即在不同的樣品(包括轉(zhuǎn)基因或非轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品)中進(jìn)行檢測,并經(jīng)測序驗(yàn)證,新設(shè)計(jì)的引物35SCP142,CPNOS165及NEST-PCR的引物都有高特異性,可用于含有相應(yīng)外源基因的產(chǎn)品檢測。

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