領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
單增李斯特菌是一種可在低溫下生長(zhǎng)、能引起人畜共患病的食源性致病菌。為克服傳統(tǒng)PCR檢測(cè)的假陽(yáng)性問(wèn)題,有效的檢測(cè)單增李斯特活菌,本研究提取單增李斯特菌的總RNA并進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,以單增李斯特菌的必要毒力基因hlyA為靶基因,設(shè)計(jì)特異性引物和TaqMan探針進(jìn)行實(shí)時(shí)PCR檢測(cè),研究了檢測(cè)的特異性和靈敏度,考查了對(duì)人工污染牛乳進(jìn)行檢測(cè)的應(yīng)用性。結(jié)果表明,所用引物和探針能較好的擴(kuò)增目的基因,而對(duì)其他食源性致病菌無(wú)交叉反應(yīng)。單增李斯特菌經(jīng)1h增菌,可檢出3×102CFU/ml。而經(jīng)3h增菌,活菌檢測(cè)限可達(dá)30CFU/ml。人工污染牛乳樣品經(jīng)6h增菌,檢測(cè)限為17CFU/ml。此方法可應(yīng)用于乳中單增李斯特菌的快速檢測(cè)和污染狀況調(diào)查。
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