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—— 中國食品雜志社
建立一種激光誘導熒光結(jié)合磁分離的檢測技術，用于在線檢測CP4-5-烯醇丙酮酸酯-3-磷酸合酶基因（CP4-5-enol acetate-3-phosphate synthase gene，CP4-EPSPS）。以氨基磁納米粒子（magnetic nanoparticles，MNPs）為載體修飾cDNA，構(gòu)建捕獲基因探針，并設計FAM熒光標記的信號基因探針（sDNA）。在目的基因CP4-EPSPS（tDNA）存在的情況下，cDNA和sDNA通過堿基互補配對原則與tDNA結(jié)合形成雙鏈結(jié)構(gòu)。該結(jié)構(gòu)通過毛細管時被磁場富集分離，然后在激光誘導熒光檢測器的作用下在線檢測其熒光信號。通過對MNPs質(zhì)量濃度、捕獲探針濃度、牛血清白蛋白質(zhì)量濃度進行考察，在優(yōu)化的實驗條件下，在1.0×10－11～2.0×10－7?mol/L范圍內(nèi)，CP4-EPSPS基因濃度與熒光峰面積呈良好線性關系，檢出限為4.0×10－12?mol/L（RSN=3），該方法成功應用于轉(zhuǎn)基因大豆的聚合酶鏈式反應擴增產(chǎn)物的檢測。
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