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黃曲霉DNA提取及PCR-RFLP檢測(cè)方法的建立
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 165 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 邵碧英, 王傳得, 鄭晶, 黃曉蓉
關(guān)鍵詞: 黃曲霉; DNA; PCR-RFLP;
摘要:

采用3種提取方法、3種菌絲前處理提取黃曲霉標(biāo)準(zhǔn)菌株的DNA,凝膠電泳結(jié)果表明經(jīng)-80℃冷凍過(guò)夜或液氮處理菌絲、用氯化芐方法提取、并經(jīng)RNase處理的DNA效果最好。合成擴(kuò)增aflR基因的2對(duì)引物,用巢式PCR驗(yàn)證PCR產(chǎn)物的非假陽(yáng)性。PCR產(chǎn)物的HincⅡ和PvuⅡ酶切結(jié)果與預(yù)期的完全一致,表明建立的黃曲霉PCR-RFLP檢測(cè)方法是可行的。

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