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呋喃唑酮殘留標示物人工抗原合成與抗體制備
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 109 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 常超, 伍金娥, 袁宗輝
關(guān)鍵詞: 呋喃唑酮; 半抗原; 人工抗原; 抗體;
摘要:

以乙醇肼和碳酸二甲酯為原料,合成2種半抗原3-氨基-2-惡唑烷酮(AOZ)和3-(4-羧基苯亞甲基)-氨基-2-惡唑烷酮(CPAOZ),經(jīng)戊二醛法和碳二亞胺法將半抗原與牛血清蛋白(BSA)偶聯(lián)合成2種人工抗原AOZ-BSA和CPAOZ-BSA,產(chǎn)物經(jīng)紫外光譜掃描分析鑒定。用2種人工抗原采取不同程序免疫新西蘭大白兔,獲得8組多克隆抗體。AOZ-BSA抗體效價1:0.8×104~1:3.2×104,對AOZ靈敏度低,IC50均大于100μg/ml。CPAOZ-BSA抗體效價1:1.6×105~1:6.4×105,對AOZ與苯甲醛衍生物N-苯亞甲基-3-氨基-2-惡唑烷酮(PAOZ)靈敏度高,IC500.91~11.56ng/ml,特異性好,僅與呋喃唑酮(交叉反應率6.15%)、3-(2-硝基苯亞甲基)-氨基-2-惡唑烷酮(NPAOZ,交叉反應率5.73%)有交叉反應,與衍生試劑苯甲醛和其他藥物沒有交叉反應(交叉反應率<0.01%)。本研究制備出AOZ特異性抗體,為我國開發(fā)AOZ酶聯(lián)免疫試劑盒奠定基礎(chǔ)。

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