領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
本實(shí)驗(yàn)室從新疆鹽湖分離得到一株產(chǎn)α-淀粉酶中度嗜鹽菌Bacillus sp.XJ1-05，根據(jù)已報(bào)道的α-淀粉酶基因(α-AMY)序列的保守區(qū)域設(shè)計(jì)引物，從中度嗜鹽菌Bacillus sp.XJ1-05基因組中擴(kuò)增出α-淀粉酶基因片段，將α-淀粉酶基因純化后克隆到pGM-T載體上測序，結(jié)果表明α-淀粉酶基因片段長約1500bp，與地衣芽孢桿菌Bacillus licheniformis的α-淀粉酶基因序列的同源性為95%，兩種序列具有一定的同源性。按正確的閱讀框架將α-淀粉酶基因片段定向克隆到表達(dá)載體pET-32a上，將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21(DE3)菌株，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)，SDS-PAGE電泳表明，α-淀粉酶基因能在大腸桿菌BL21中成功表達(dá)，確定表達(dá)蛋白的相對(duì)分子量為61kD左右，與理論推導(dǎo)的分子量相一致；構(gòu)建的大腸桿菌工程菌，所產(chǎn)生的α-淀粉酶是包涵體，通過超聲波粉碎儀粉碎后，測α-淀粉酶酶活為原菌的1.8倍。
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