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建鯉葡萄糖激酶基因全長cDNA 的克隆及組織表達(dá)
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 172 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 程漢良,彭永興,孟學(xué)平,孫斯平,施曉云,董志國,申 欣
關(guān)鍵詞: 建鯉|葡萄糖激酶基因|快速擴增cDNA 末端|全長cDNA
摘要:

采用RT-PCR 和RACE 方法克隆建鯉(Cyprinus carpio Var. Jian)葡萄糖激酶(GK)基因全長cDNA 序列,結(jié)果表明:建鯉GK 基因cDNA 全長2041bp,含1 個1431bp 的開放閱讀框(ORF),編碼476 個氨基酸,GK 蛋白分子量53.6kD,等電點5.13,建鯉GK 氨基酸序列保守基序包括:1 個己糖激酶標(biāo)簽序列Leu156-Phe181、2 個N- 連接糖基化位點Asn176 和Asn214、1 個細(xì)胞黏附序列Arg202-Asp204 和1 個糖胺聚糖黏附位點Ser455-Gly458,其氨基酸序列與翹嘴紅鲌、人和鼠的GK 氨基酸序列相似百分比分別為96.2%、79.8% 和79.1%;以β-actin 基因為內(nèi)標(biāo),采用半定量RT-PCR 方法對GK 基因在腸系膜脂肪組織、肝臟、心臟、肌肉和大腦等組織的表達(dá)進(jìn)行研究,結(jié)果表明GK 基因僅在肝臟和大腦中表達(dá),在肝臟中的表達(dá)水平高于大腦。

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