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卡那霉素酶聯(lián)免疫檢測方法的建立及檢測條件的優(yōu)化
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 155 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 劉麗強,華朱鳴,許定花,陳 偉,胥傳來*
關(guān)鍵詞: 卡那霉素|ELISA|抗體|直接競爭|間接競爭
摘要:

制備卡那霉素的多克隆抗體,建立了間接競爭ELISA 方法,并對間接ELISA 檢測方法進行條件優(yōu)化。結(jié)果表明:最佳實驗條件是以PBS(0.01mol/L、pH7.4)作為包被液,以碳0.05mol/L pH9.6 酸緩沖液加0.1% 的酪蛋白封閉酶標(biāo)板;最佳的抗體稀釋液配方是PBST 溶液加4% 的聚乙二醇6000,溶液選取pH8.5 為佳,二抗稀釋度選擇1:3000,標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液則選擇0.01mol/L pH7.4 的PBS 溶液。最終,卡那霉素的IC50 值為9.9ng/ml,最低檢測限為1.0ng/ml,檢測的線性范圍為1~500ng/ml。

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