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Taqman-MGB探針RT-PCR方法檢測食品中脊髓灰質(zhì)炎病毒
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 123 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 李想,黃一,潘良文,盧鐘山,張舒亞,呂蓉,劉月明,高琴
關(guān)鍵詞: 脊髓灰質(zhì)炎病毒|實時熒光RT-PCR|Taqman-MGB 探針|食品|參照分子
摘要:

目的:建立食品中脊髓灰質(zhì)炎病毒Taqman-MGB 探針實時熒光RT-PCR 檢測方法。方法:在脊髓灰質(zhì)炎病毒基因組2A 區(qū)設(shè)計引物和探針,對3 種血清型脊髓灰質(zhì)炎病毒進行單獨和同時檢測。通過參照分子建立標(biāo)準曲線,對人工接種病毒的牡蠣、藍莓、生菜和水食品樣品進行檢測。結(jié)果:建立的檢測體系分別高度特異于相應(yīng)血清型病毒檢測,對3 種血清型脊髓灰質(zhì)炎病毒進行單獨和同時檢測的下限均為2 拷貝參照分子DNA。基于參照分子建立的4 條標(biāo)準曲線具有很好線性關(guān)系(R2 = 0.999)和較高反應(yīng)效率(1.01~1.04)。對4 種食品樣品的分析表明,建立的實時熒光RT-PCR 方法可穩(wěn)定檢測到各添加濃度脊髓灰質(zhì)炎病毒。結(jié)論:建立的Taqman-MGB 探針實時熒光RT-PCR 檢測體系適于食品中脊髓灰質(zhì)炎病毒的檢測。

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