食源性降血壓肽在調(diào)節(jié)機(jī)體血壓過程中發(fā)揮著一定的積極作用。本實(shí)驗采用堿性蛋白酶水解南瓜籽蛋白,水解物經(jīng)膜分離獲得血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽,通過質(zhì)譜鑒定其結(jié)構(gòu),并采用抑制動力學(xué)和分子對接方法研究ACE抑制肽的活性機(jī)制;此外,通過ACE抑制活性實(shí)驗、自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHRs)模型等評價南瓜籽蛋白水解物、膜分離組分以及南瓜籽肽的降血壓活性。結(jié)果表明,低于1 kDa南瓜籽蛋白水解物組分ACE抑制活性較好,1 mg/mL下ACE抑制率為46.22%,100 mg/kg mb 劑量下灌胃SHRs 6 h后收縮壓可以降低21.42 mm Hg;鑒定出9 個ACE抑制肽(LLV、LVF、LTPL、SVLF、LLPQ、MLPL、LLPGF、VLLPE和RFPLL),其中RFPLL、LLPGF、MLPL和LVF具有較好的ACE抑制活性,半抑制濃度均低于1 mmol/L;RFPLL和LVF具有較好的降血壓活性,30 mg/kg mb劑量下灌胃6 h后SHRs的收縮壓降低量分別為37.0 mm Hg和22.2 mm Hg,SHRs的舒張壓降低量分別為17.0 mm Hg和11.2 mm Hg;RFPLL、LLPGF、MLPL和LVF可以很好地對接ACE的活性中心,RFPLL是ACE混合型抑制劑,MLPL對ACE的抑制模式可能是競爭型抑制,LLPGF、LVF可能是ACE的非競爭型抑制劑。綜上,低于1 kDa南瓜籽蛋白水解物是一種良好的降血壓功能食品原料,其中RFPLL和LVF可用于降血壓功能食品或者藥品的開發(fā)原料。
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