領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
采用聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）對(duì)β-乳球蛋白（β-lactoglobulin，β-LG）羧基共價(jià)修飾，探究PEG修飾及PEG化程度對(duì)β-LG抗原性和結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果表明：總修飾率為82.91%；使用SP?Sepharose?Fast?Flow陽離子交換柱分離純化，獲得純度分別為99.66%和98.61%的兩種主要修飾產(chǎn)物；十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳及基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜鑒定產(chǎn)物分子質(zhì)量分別為23.3?kDa和28.6?kDa，為單修飾產(chǎn)物（mono-PEG-β-LG）及兩點(diǎn)修飾產(chǎn)物（di-PEG-β-LG）。β-LG、mono-PEG-β-LG和di-PEG-β-LG的間接競爭酶聯(lián)免疫吸附測定半抑制濃度（IC50）分別為1.90、2.47?μg/mL和10.41?μg/mL；mono-PEG-β-LG和di-PEG-β-LG的IC50分別是β-LG的1.30?倍和5.48?倍，表明提高PEG修飾程度可極顯著降低β-LG的抗原性。mono-PEG-β-LG和di-PEG-β-LG的游離巰基含量分別為42.70?μmol/g和37.97?μmol/g，表明PEG化程度增強(qiáng)，遮蔽作用增強(qiáng)。表面疏水性和內(nèi)源熒光分析表明，mono-PEG-β-LG只發(fā)生了三級(jí)結(jié)構(gòu)變化，而di-PEG-β-LG二級(jí)結(jié)構(gòu)水平同時(shí)發(fā)生變化，表明PEG修飾后β-LG空間結(jié)構(gòu)的改變可能是導(dǎo)致其構(gòu)象表位破壞和抗原性下降的因素。PEG分子遮蔽可能是導(dǎo)致修飾產(chǎn)物抗原性降低的另一原因。PEG共價(jià)修飾β-LG可以顯著降低后者的抗原性，且隨PEG化程度增大β-LG抗原性降低幅度增加。
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