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鴨肝谷氨酸脫氫酶的純化與酶學(xué)性質(zhì)研究
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 152 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 朱 鴻,李想韻,王 松,付偉麗,唐靚婷,誥趙偉,唐云明*
關(guān)鍵詞: 鴨肝|谷氨酸脫氫酶|分離純化|性質(zhì)
摘要:

目的:獲得鴨肝谷氨酸脫氫酶純品并對(duì)其酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究。方法:采用丙酮脫脂、重金屬離子沉淀、硫酸銨分級(jí)沉淀、DEAE-Sepharose 離子交換層析和Sephacryl S-200 凝膠層析方法,分離純化鴨肝谷氨酸脫氫酶,用SDS- 聚丙烯酰胺凝膠電泳法進(jìn)行純度鑒定和酶相對(duì)分子質(zhì)量測(cè)定。結(jié)果:從鴨肝中分離純化獲得電泳純的谷氨酸脫氫酶,純化倍數(shù)為60.93 倍,酶活力回收率為11.02%,比活力達(dá)24.37U/mg。酶相對(duì)分子質(zhì)量為371.41,亞基相對(duì)分子質(zhì)量為61.60。推測(cè)該酶由6 個(gè)相同亞基構(gòu)成。該酶對(duì)NADH 的Km 為53.19μmol/L,最適pH 值為10.0,最適反應(yīng)溫度為35℃。該酶在pH8.0 左右較穩(wěn)定;在40℃以下酶活力保持穩(wěn)定。Zn2+、Li+ 和Cu2+ 對(duì)該酶具有顯著的抑制作用。結(jié)論:分離純化獲得谷氨酸脫氫酶,該酶具有較高應(yīng)用價(jià)值。

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