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麥芽糖轉(zhuǎn)糖基酶在畢赤酵母中的表達及活性分析
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 148 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 朱國強,王水興* ,黃 蘭,朱石龍
關鍵詞: 麥芽糖轉(zhuǎn)糖基酶|畢赤酵母|基因重組
摘要:

用PCR 方法從E.coli BL21(DE3)中獲得麥芽糖轉(zhuǎn)糖基酶基因,將該基因插入到酵母表達載體pPIC9K 的α分泌信號開放閱讀框的下游,對重組質(zhì)粒pPIC9K-MalQ 所含的外源片段進行雙向測序。將測序正確的重組質(zhì)粒用內(nèi)切酶Sal Ⅰ線性化,電穿孔轉(zhuǎn)化到GS115 感受態(tài)細胞中,G418 梯度篩選高拷貝轉(zhuǎn)化菌及PCR 鑒定目的基因的整合,1% 甲醇誘導表達。經(jīng)薄層色譜分析粗酶液處理的麥芽二糖溶液,證實粗酶液具有麥芽糖轉(zhuǎn)糖基酶活性。

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