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新霉素ELISA檢測方法的建立
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 112 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 劉沙洲,桑小雪,歐陽華學(xué),雷紹榮,白林含
關(guān)鍵詞: 新霉素|多克隆抗體|競爭酶聯(lián)免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)|方法建立
摘要:

目的:比較直接和間接競爭酶聯(lián)免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)的優(yōu)缺點(diǎn),建立新霉素殘留ELISA檢測方法。方法:利用自制的新霉素多克隆抗體,采用直接競爭和間接競爭ELISA方法檢測新霉素殘留,并比較兩種方法的優(yōu)缺點(diǎn)。結(jié)果:新霉素抗血清和慶大霉素的交叉反應(yīng)率為2.04%,和卡那霉素的交叉反應(yīng)率為0.02%,和氨芐青霉素、紅霉素、四環(huán)素的交叉反應(yīng)率均小于0.01%。初步測試新霉素間接競爭ELISA法的準(zhǔn)確性和回收率。板內(nèi)誤差小于4%,板間誤差小于11%,回收率為135.5%~191.3%。直接競爭和間接競爭ELISA方法的檢測極限分別為28.58ng/mL和51.74ng/mL,達(dá)到了國家對新霉素規(guī)定的500μg/kg MRL檢測限。結(jié)論:建立了直接競爭和間接ELISA吸附檢測方法,條件優(yōu)化更成功的間接競爭ELISA可用于開發(fā)新霉素檢測試劑盒。

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