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環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法快速檢測耐甲氧西林金黃色葡萄球菌
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 169 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 朱 麗,霍貴成*
關(guān)鍵詞: 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)|mecA基因|耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)|肉眼檢測|spa基因
摘要:

建立一種應(yīng)用環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法快速檢測耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin-resistan Staphylococcus aureus,MRSA)中mecA和spa基因的檢測方法。以金葡菌和其他相關(guān)菌種為試驗(yàn)對象,分別用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(ploymerase chain reaction,PCR)和LAMP方法檢測mecA和spa基因。結(jié)果表明:LAMP法在64℃等溫條件下可在60min內(nèi)成功擴(kuò)增基因,且與傳統(tǒng)PCR方法結(jié)果相同;通過瓊脂糖凝膠電泳可知,LAMP對mecA和spa基因的檢測限分別為每菌管102個(gè)和10個(gè)細(xì)胞;肉眼可檢測到的mecA和spa基因的檢測限分別為每菌管103個(gè)和10個(gè)細(xì)胞;然后用LAMP法檢測人工污染原料乳樣本中MRSA,用LAMP法檢測原料乳中的mecA和spa基因與PCR方法顯示出相同的結(jié)果。LAMP方法可快速檢測mecA和spa基因,此方法可應(yīng)用于原料乳中MRSA的檢測。

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