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苦蕎蘆丁水解酶的最適作用條件及Cu2+對酶活性的抑制
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 164 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 崔曉東,王轉(zhuǎn)花*
關(guān)鍵詞: 苦蕎|槲皮素|蘆丁水解酶| 熒光光譜
摘要:

干燥的苦蕎麥種子粉碎后經(jīng)20mmol/L的醋酸鹽緩沖液抽提,Resource Q和Superdex G75 HR 10/300凝膠柱分離純化,得到一種蘆丁水解酶,測定該酶的最適作用條件,研究Cu2+對該酶的抑制作用。結(jié)果表明:苦蕎蘆丁水解酶的分子質(zhì)量約70kD,最適作用pH值為5.0。反應體系選擇20%乙醇時,可保留酶的活性不被抑制,當乙醇體積分數(shù)大于50%時,對酶的活性抑制率達90%以上,表明可選用低體積分數(shù)乙醇作為蘆丁的溶劑,用于蘆丁水解酶測活體系及后續(xù)槲皮素制備研究。熒光光譜表明,Cu2+與蘆丁水解酶以物質(zhì)的量比1:1的形成穩(wěn)定的復合物,可以使酶的熒光發(fā)生猝滅,水解蘆丁的活性降低。表明Cu2+對蘆丁水解酶有抑制作用。

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