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Monellin-EGFP融合蛋白在畢赤酵母中的表達
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 121 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 金筱耘,趙愛春,李 軍,李鎮(zhèn)剛,王茜齡,吳存容,余茂德*
關(guān)鍵詞: Monellin甜蛋白|綠色熒光蛋白|真核表達|桑樹
摘要:

根據(jù)已報道的Monellin甜蛋白氨基酸序列,結(jié)合畢赤酵母與桑樹密碼子的偏好性,人工設(shè)計合成單鏈monellin基因,并與增強型綠色熒光蛋白EGFP基因連接,構(gòu)建融合表達載體。采用電擊轉(zhuǎn)化法成功將表達載體導(dǎo)入畢赤酵母GS115中,并獲得高效表達的重組子pPIC9K-M-E。經(jīng)PCR檢測,SDS-PAGE和Western Blot雜交證實已表達出融合蛋白,該蛋白經(jīng)純化與盲測實驗,結(jié)果顯示其甜度約為標準蔗糖的500倍。

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