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綠色木霉β-葡萄糖苷酶的分離純化及酶學(xué)性質(zhì)
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 177 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 劉 穎,韓春然,張 帥,張瑋瑋,竇博鑫
關(guān)鍵詞: 綠色木霉;β-葡萄糖苷酶;分離純化;酶學(xué)性質(zhì)
摘要:

針對(duì)綠色木霉AS3.3711產(chǎn)生的β-葡萄糖苷酶組分,先后運(yùn)用包括乙酸銨沉淀、透析、Sephadex G-150葡聚糖凝膠柱層析在內(nèi)的一系列分離純化技術(shù)對(duì)該纖維素酶進(jìn)行純化,得到β-葡萄糖苷酶純化組分,并對(duì)該酶的酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究。純化后酶液的蛋白質(zhì)量濃度為8.12 mg/mL、酶活力為4.08 U/mL,純化倍數(shù)達(dá)到18.48,十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecylsulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)測(cè)定分子質(zhì)量為66.0 kD。綠色木霉β-葡萄糖苷酶在酸性條件下穩(wěn)定性良好,最適pH值為5.0;在溫度60~70 ℃能長時(shí)間保持較高酶活力,最適反應(yīng)溫度為60 ℃。金屬離子中,Ca2+、Mg2+、K+對(duì)綠色木霉AS3.3711 β-葡萄糖苷酶活力起到促進(jìn)作用,Ca2+促進(jìn)作用最強(qiáng);而Zn2+、Fe3+對(duì)該酶有抑制作用,Ag+、Cu2+、Hg2+重金屬離子使β-葡萄糖苷酶幾乎喪失了全部活性。

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