領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
采用飽和定點突變和高通量篩選技術(shù)，對北京棒桿菌天冬氨酸激酶（aspartate kinase，AK）AK Gly377位點進行突變，并篩選獲得高活力突變體G377F，分離純化后對G377F AK酶學(xué)性質(zhì)進行表征。結(jié)果表明：突變體AK最適pH值為9.0，較突變前野生型（wide type，WT）最適pH值為8.5有所提高；最適反應(yīng)溫度與WT一致，均為25 ℃；半衰期由WT的2.6 h提高到5.3 h；pH耐受性在5 h內(nèi)保持其活力50%以上，與WT 3 h內(nèi)酶活力保持能力相同。G377F對金屬離子和有機溶劑均表現(xiàn)出良好的抗性。其中，Lys的抑制作用在一定程度上被解除，當(dāng)Lys和Met同時存在時對AK具有明顯的激活作用。動力學(xué)研究顯示：G377F AK Vmax較WT提高9.3 倍；n值為1.0明顯低于WT的2.7，說明AK正協(xié)同性降低，趨向于米氏酶。
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