領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
為了明確非催化結(jié)構(gòu)域碳水化合物結(jié)合模塊（carbohydrate-binding module，CBM）和F5/8 C型結(jié)構(gòu)域?qū)衷迥z裂解酶AlgL7酶學(xué)性質(zhì)的影響，構(gòu)建并表征了全長(zhǎng)酶AlgL7和兩個(gè)截短酶CD1（催化結(jié)構(gòu)域）和CD2（包含F(xiàn)5/8 C型結(jié)構(gòu)域和催化結(jié)構(gòu)域）。結(jié)果表明，與全長(zhǎng)AlgL7相比，截短酶CD2表現(xiàn)出更高的比活力、熱穩(wěn)定性和Km值，以及更高的最大反應(yīng)速率（Vmax值），表明CBM結(jié)構(gòu)域在保持酶與底物的親和力方面具有重要作用，但降低了酶的催化活性、熱穩(wěn)定性和Vmax值。與截短酶CD1相比，CD2表現(xiàn)出更高的比活力、最適反應(yīng)溫度、熱穩(wěn)定性、最大反應(yīng)速率和Km值，表明F5/8 C型結(jié)構(gòu)域有利于提高酶的催化活性、最適反應(yīng)溫度、熱穩(wěn)定性和最大反應(yīng)速率，但降低了酶與底物的親和力。以海藻酸鈉為底物，截短酶CD2的比活力為183.9 U/mg，最適反應(yīng)溫度和最適反應(yīng)pH值分別為40 ℃和7.0，Km值和Vmax值分別為39.80 mg/mL和2 000 U/mg，酶解產(chǎn)物主要為褐藻膠寡糖二糖和三糖。本研究促進(jìn)了非催化結(jié)構(gòu)域與褐藻膠裂解酶性質(zhì)的構(gòu)效關(guān)系研究，為利用非催化結(jié)構(gòu)域改善褐藻膠裂解酶的催化性質(zhì)提供了一定理論基礎(chǔ)。
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