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蕹菜過(guò)氧化物酶的分離純化及理化性質(zhì)
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 149 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 王紅揚(yáng),王 潔,李 星,唐云明
關(guān)鍵詞: 蕹菜;過(guò)氧化物酶;分離純化;酶活力
摘要:

新鮮蕹菜經(jīng)硫酸銨分級(jí)沉淀、DEAE-Sepharose離子交換層析和Superdex-200凝膠過(guò)濾層析后獲得電泳純的過(guò)氧化物酶(peroxidase,POD),該酶的比活力、回收率、純化倍數(shù)和產(chǎn)率分別為35 972.96 U/mg、12.21%、168.48和211.07 U/g。該酶的亞基分子質(zhì)量為42.7 kD,最適溫度為40 ℃,最適pH值為6,并且在20~50 ℃及pH 5~8的范圍內(nèi)具有良好的穩(wěn)定性。以不同濃度的H2O2為底物,測(cè)得該酶的Km值為18.32 mmol/L。NaCl、尿素(Urea)、Zn2+、Mg2+對(duì)該酶都具有較強(qiáng)的激活作用,十二烷基硫酸鈉(sodium dodecyl sulfate,SDS)、硫氰化鉀(potassium thiocyanate,KSCN)、抗壞血酸(ascorbic acid,AsA)、Ba2+、Mn2+ 、Fe2+、甲醇、乙醇、正丁醇和異丙醇對(duì)蕹菜POD活力均有抑制作用,其中抗壞血酸對(duì)POD有極強(qiáng)的抑制作用,當(dāng)濃度為0.01 mol/L時(shí),酶活力接近于0。

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