領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
從L-乳酸生產(chǎn)菌米根霉（Rhizopus oryzae）菌株AS 3.819基因組DNA中分別擴(kuò)增得到了乳酸脫氫酶基因（ldhA）、丙酮酸脫氫酶基因（pdcA）、淀粉糖化酶基因（amyA）以及磷酸甘油酸酯激酶基因（pgk1）的啟動(dòng)子片段，并構(gòu)建啟動(dòng)子探針載體pUKMR，以β-內(nèi)酰胺酶基因（bla）為報(bào)告基因在大腸桿菌JM109中對(duì)這些啟動(dòng)子片段進(jìn)行篩選及啟動(dòng)活性檢測(cè)。結(jié)果表明：4 種啟動(dòng)子片段成功啟動(dòng)報(bào)告基因表達(dá)；在非底物誘導(dǎo)情況下，ldhA和pgk1啟動(dòng)子啟動(dòng)活性較強(qiáng)；在有合適碳源底物誘導(dǎo)情況下pdcA和amyA啟動(dòng)子擁有更高的啟動(dòng)活性；ldhA基因的啟動(dòng)子啟動(dòng)活性隨著啟動(dòng)子片段長(zhǎng)度的增加有一定提高，而在長(zhǎng)度為500 bp以上時(shí)，其啟動(dòng)活性變化不明顯。本研究為Rhizopus oryzae提供了一種快速簡(jiǎn)便的啟動(dòng)子捕獲分離及啟動(dòng)活性檢測(cè)方法。
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