TaqMan探針實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)低溫酸乳中常見(jiàn)的霉菌和酵母
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為提高低溫酸乳中霉菌和酵母菌檢測(cè)效率，根據(jù)保守基因延伸因子1α（elongation factor 1α，EF-1α）序列分別針對(duì)霉菌與酵母菌設(shè)計(jì)引物與探針，利用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，基于TaqMan探針?lè)謩e建立霉菌和酵母菌檢測(cè)方法。以低溫酸乳中常見(jiàn)真菌與乳酸菌基因組DNA為擴(kuò)增模板進(jìn)行特異性檢驗(yàn)，并對(duì)方法靈敏度與重復(fù)性進(jìn)行檢驗(yàn)，同時(shí)構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。結(jié)果表明：根據(jù)EF-1α基因設(shè)計(jì)的引物與探針特異性良好；所構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)相關(guān)系數(shù)均大于0.99；該方法檢測(cè)酵母菌的靈敏度為101?CFU/mL，檢測(cè)霉菌的靈敏度為102?CFU/mL；重復(fù)性檢驗(yàn)中組內(nèi)與組間的變異系數(shù)均小于2%，表明方法具有良好的可靠性與穩(wěn)定性，適用于低溫酸乳中霉菌與酵母菌的快速檢測(cè)。
閱讀量: 117 發(fā)表時(shí)間: 2024-11-06
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