領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
查爾酮合酶（chalcone synthase，Chs）與查爾酮異構(gòu)酶（chalcone isomerase，Chi）是植物類黃酮合成代謝途徑中的兩個(gè)關(guān)鍵酶。采用同源克隆、反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR）、融合引物嵌套PCR（fusion primer and nested integrated PCR，F(xiàn)PNI-PCR）與3’-cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)（rapid amplification of cDNA end，RACE）相結(jié)合，分別克隆出油橄欖chs與chi基因全長(zhǎng)。序列分析表明，油橄欖chs基因全長(zhǎng)DNA（GenBank登錄號(hào)：KF935223.1）和cDNA（GenBank登錄號(hào)：KF935224.1）序列分別為2 085 bp和1 173 bp，該基因的開放閱讀框（open reading frame，ORF）編碼390 個(gè)氨基酸，其氨基酸序列與葡萄和番茄全長(zhǎng)Chs氨基酸序列的相似度在90%左右。生物信息學(xué)分析表明，該基因編碼的蛋白屬于Chs蛋白家族。油橄欖chi基因全長(zhǎng)DNA（GenBank登錄號(hào)：KF886190）和cDNA（GenBank登錄號(hào)：KF886191）序列分別為1 373 bp和750 bp，其ORF編碼249 個(gè)氨基酸，該氨基酸序列與已報(bào)道的其他植物Chi氨基酸序列的相似度最高在65%左右，序列中包含一段由198 個(gè)氨基酸殘基組成的具有分子內(nèi)裂解酶活性的功能域，符合Chi蛋白家族特征。
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