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Pseudomonas sp. W7產低溫蛋白酶培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件的優(yōu)化
來源:食品科學網 閱讀量: 158 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 康傳紅,田亞新,李秀涼,董義杰,原繼紅,王運來,韓曉云
關鍵詞: 低溫蛋白酶;假單胞菌W7;培養(yǎng)條件優(yōu)化;響應面分析
摘要:

采用Plackett-Burman法對影響假單胞菌(Pseudomonas sp.)W7產低溫蛋白酶的因素進行顯著性分析,篩選出對產酶影響顯著的3 個因素:葡萄糖、蛋白胨和MgSO4;然后用最陡爬坡試驗逼近最大產酶區(qū)域;應用Box-Behnken原理設計和響應面分析確定產酶培養(yǎng)基的最佳組合為:葡萄糖4.25 g/L、蛋白胨7.00 g/L、干酪素4.00 g/L、K2HPO4 5.00 g/L、KH2PO4 1.00 g/L、CaCl2 0.26 g/L、MgSO4 0.14 g/L,低溫蛋白酶的酶活力達到了183.9 U/mL,比優(yōu)化前提高了21%。另外,對Pseudomonas sp. W7的產酶條件進行了優(yōu)化,在單因素的基礎上,利用正交試驗設計,最終確定產酶的最優(yōu)培養(yǎng)條件為:培養(yǎng)溫度為20 ℃、初始pH值為7.0、接種量為3%、裝液量為20%、搖床轉速為100 r/min,在最佳條件時測得的酶活力為193.2 U/mL。通過生長曲線和產酶曲線的測定,確定產酶的培養(yǎng)時間為48 h。

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