領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
利用逐級(jí)鹽析法結(jié)合雙水相萃取對(duì)葛仙米藻藍(lán)蛋白進(jìn)行純化，設(shè)計(jì)三因素二次回歸正交旋轉(zhuǎn)組合試驗(yàn)對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，并應(yīng)用Design-Expert 7.0軟件建立了各影響因素與萃取純度的數(shù)學(xué)回歸模型。結(jié)果顯示最佳的提取工藝為：20% (NH4)2SO4鹽析去沉淀后用40%和50% (NH4)2SO4鹽析得藻藍(lán)蛋白，再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%的聚乙二醇6 000、質(zhì)量分?jǐn)?shù)18%的(NH4)2SO4進(jìn)行雙水相萃取。所得產(chǎn)物純度可達(dá)到8.6，回收率為71.40%。對(duì)所得產(chǎn)物進(jìn)行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析，得到清晰的兩條條帶（條帶1和條帶2），其分子質(zhì)量分別在35 ku和15 ku左右。通過(guò)質(zhì)譜分析可知，條帶2的分子質(zhì)量為15 ku左右，等電點(diǎn)5.35，部分肽的氨基酸序列為TPLTEAVAAADSQGR和DIGYYLR。通過(guò)SWISS-MODEL網(wǎng)站模擬蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)得出，條帶2可能是葛仙米藻藍(lán)蛋白的α亞基。
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