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應(yīng)用依賴解旋酶DNA擴(kuò)增技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因大豆
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 161 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 章晶晶,王 贊,張翠俠,馬超峰,周 巍,張 巖
關(guān)鍵詞: 依賴解旋酶DNA擴(kuò)增;轉(zhuǎn)基因大豆;檢測(cè)
摘要:

目的:基于依賴解旋酶DNA恒溫?cái)U(kuò)增(helicase-dependent isothermal DNA amplification,HDA)技術(shù),建立快速檢測(cè)轉(zhuǎn)基因大豆的方法。方法:采用以CaMV35S、NOS、CP4-EPSPS 3 種外源基因和內(nèi)源基因Lectin(大豆凝集素基因)為目的片段設(shè)計(jì)4 對(duì)特異引物,建立反應(yīng)體系,通過(guò)HDA方法對(duì)內(nèi)源基因和3 種外源基因的檢測(cè)特異性和靈敏度進(jìn)行實(shí)驗(yàn),并對(duì)結(jié)果進(jìn)行同源性分析。結(jié)果:建立了轉(zhuǎn)基因大豆HDA檢測(cè)法,檢測(cè)特異性良好,3 種外源基因的檢出限為0.2%。結(jié)論:轉(zhuǎn)基因大豆的HDA檢測(cè)方法具有普通聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的特異、靈敏等特點(diǎn),并且對(duì)儀器要求更低,極適合基層實(shí)驗(yàn)室使用,具有廣闊的應(yīng)用前景。

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