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3 種食源性致病菌Tem-PCR檢測方法的建立
來源:食品科學網 閱讀量: 165 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 劉忠梅,徐義剛,曲 敏,莫春生,劉新亮,李蘇龍
關鍵詞: 靶序列富集多重PCR方法;沙門氏菌;金黃色葡萄球菌;志賀氏菌
摘要:

應用靶序列富集多重聚合酶鏈式反應(target-enriched multiplex-polymerase chain reaction,Tem-PCR)技術建立金黃色葡萄球菌、沙門氏菌和志賀氏菌3 種食源性致病菌的快速檢測方法。分別以金黃色葡萄球菌femA基因、沙門氏菌invA基因和志賀氏菌ipaH基因為靶基因,設計3 對特異性引物,并與通用引物連接組成Tem-PCR引物,通過反應條件優(yōu)化,建立了Tem-PCR檢測方法。結果顯示,建立的Tem-PCR方法特異性強,對沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和志賀氏菌的檢測靈敏度分別為1.1×103、2×103 CFU/mL和1.2×103 CFU/mL。Tem-PCR檢測方法有效地解決了傳統(tǒng)多重PCR引物擴增效率不均衡的問題。

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