領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
在大腸桿菌BL21 Star (DE3)中建立了2’-巖藻糖基乳糖（2’-fucosyllactose，2’-FL）的從頭合成途徑，通過(guò)CRISPR/Cas9系統(tǒng)敲除了β-半乳糖糖苷酶基因lacZ M15序列和尿苷二磷酸-葡萄糖脂質(zhì)載體轉(zhuǎn)移酶基因wcaJ，探究了操縱子、假操縱子和單順?lè)醋??種不同通路配置對(duì)重組大腸桿菌合成2’-FL的影響。結(jié)果表明：從頭合成途徑的基因在大腸桿菌BL21?Star?(DE3)過(guò)表達(dá)后搖瓶發(fā)酵產(chǎn)生的2’-FL質(zhì)量濃度為0.34?g/L。敲除lacZ?M15和wcaJ后，重組菌產(chǎn)生的2’-FL質(zhì)量濃度增加到了1.26?g/L。在操縱子形式下，重組菌BS-7搖瓶發(fā)酵產(chǎn)生的2’-FL質(zhì)量濃度最高，達(dá)1.92?g/L。BS-7在10?L發(fā)酵罐中分批補(bǔ)料發(fā)酵37?h后產(chǎn)生的2’-FL質(zhì)量濃度達(dá)到14.04?g/L，2’-FL產(chǎn)率為0.59?g/（L·h），乳糖轉(zhuǎn)化率為63%。因此，大腸桿菌合成2’-FL過(guò)程中，較低的基因表達(dá)強(qiáng)度更有助于提高其產(chǎn)量，同時(shí)可提高底物的轉(zhuǎn)化效率。
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