領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
弧菌外膜蛋白（outer membrane protein，OMP）OmpK不僅可激發(fā)機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫，而且可在不同血清型菌株之間產(chǎn)生免疫交叉反應(yīng)。本研究利用克隆測(cè)序和查找GenBank獲得20 株弧菌的Ompk基因序列并構(gòu)建Ompk系統(tǒng)進(jìn)化樹，對(duì)比分析20 株弧菌Ompk基因序列；利用原核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)野生株Vibrio parahaemolyticus B的OmpK，純化OmpK后制備兔多克隆抗體；采用酶聯(lián)免疫吸附分析法和蛋白質(zhì)印跡法（Western-blotting）分別檢測(cè)抗體效價(jià)和特異性。系統(tǒng)進(jìn)化樹和基因序列比對(duì)結(jié)果顯示Ompk基因在弧菌中高度保守，核苷酸序列相似性在77%以上；原核表達(dá)系統(tǒng)成功表達(dá)了弧菌OmpK，蛋白經(jīng)純化后成功制備的兔多抗效價(jià)達(dá)1∶16 000；Western-blotting實(shí)驗(yàn)證實(shí)抗體具有很好的特異性；OmpK多克隆抗體在弧菌中普遍存在免疫交叉性。因此，弧菌Ompk基因序列分析及其抗體研制，不僅為弧菌快速免疫學(xué)檢測(cè)提供可能性，也為以O(shè)mpK為靶點(diǎn)的水產(chǎn)疫苗研制奠定了基礎(chǔ)。
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