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菠蘿泛菌β-1,4-內(nèi)切葡聚糖酶基因克隆、表達(dá)與酶活性分析
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 142 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 侯進(jìn)慧,張 翔,喬高翔
關(guān)鍵詞: 內(nèi)切葡聚糖酶;原核表達(dá);活性分析
摘要:

利用分子克隆的方法,對(duì)一種源于菠蘿泛菌的內(nèi)切葡聚糖酶(即β-1,4-內(nèi)切葡聚糖酶)基因進(jìn)行克隆、原核表達(dá),利用Ni-NTA吸附柱對(duì)表達(dá)的重組內(nèi)切葡聚糖酶進(jìn)行純化,分析重組酶的活性。研究結(jié)果顯示,此重組內(nèi)切葡聚糖酶含1 個(gè)1 002 bp的開放閱讀框,編碼334 個(gè)氨基酸序列,重組酶在大腸桿菌細(xì)胞中的表達(dá)量占可溶性蛋白的50%以上,經(jīng)過(guò)純化獲得了純度高于95%的內(nèi)切葡聚糖酶蛋白,酶活力可以達(dá)到2 245 U/mL。

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