領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
目的：以乳粉中污染的阪崎腸桿菌（Enterobacter sakazakii）為檢測(cè)目標(biāo)，開發(fā)一種能快速檢測(cè)其污染的試劑盒。方法：以兩株阪崎腸桿菌單克隆抗體分別為包被抗體和檢測(cè)抗體，建立雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)方法，優(yōu)化各個(gè)反應(yīng)條件，制成在2 h內(nèi)能發(fā)生顯色反應(yīng)的檢測(cè)試劑盒。結(jié)果：包被抗體的最佳工作質(zhì)量濃度為10 μg/mL，檢測(cè)抗體的最佳稀釋倍數(shù)為1∶5 000。試劑盒的檢測(cè)限為104 CFU/mL，在104～108 CFU/mL范圍內(nèi)OD450 nm值與阪崎腸桿菌濃度的常用對(duì)數(shù)值呈線性關(guān)系。特異性實(shí)驗(yàn)中，試劑盒可檢出3 株阪崎腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株，對(duì)其他9 株食品中常見(jiàn)致病菌的檢測(cè)均呈陰性。模擬帶菌實(shí)驗(yàn)中，初始菌濃度為1 CFU/mL的模擬樣品經(jīng)過(guò)8 h前增菌后，通過(guò)該試劑盒便可檢出。該試劑盒的批內(nèi)、批間變異系數(shù)均小于6%，至少可在室溫保存6 個(gè)月。結(jié)論：該雙抗體夾心試劑盒具有靈敏度高、特異性好、精密度高、穩(wěn)定性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，可應(yīng)用于乳粉中阪崎腸桿菌的快速檢測(cè)。
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