領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
以從黃牛瘤胃中分離到的一株具有將亞油酸轉(zhuǎn)化為c9,t11-共軛亞油酸（conjugated linoleic acid，CLA）的干酪乳桿菌（Lactobacillus casei）Fx為出發(fā)菌株，提取其基因組DNA，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chainreaction，PCR）擴(kuò)增得到1 700 bp大小的亞油酸異構(gòu)酶（linoleic acid isomerase，LAI）基因片段，將該基因片段純化后進(jìn)行TA克隆，得到重組質(zhì)粒pUCm-T-LAI，將重組質(zhì)粒pUCm-T-LAI和表達(dá)質(zhì)粒pET-DsbA同時(shí)進(jìn)行雙酶切，連接得到重組表達(dá)載體pET-DsbA-LAI，經(jīng)PCR鑒定和酶切后，將重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21中，得到具有LAI活性的重組菌株，能將亞油酸轉(zhuǎn)化為c9,t11-CLA，表明從Lactobacillus casei Fx成功克隆LAI，該研究將有助于深入了解不同瘤胃細(xì)菌特異性合成不同CLA異構(gòu)體的LAI基因差異。
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