領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
抗生素的過度使用給自然生態(tài)帶來諸多不利影響，尋找合適的抗生素的替代物，從而減少抗生素的使用正 成為當(dāng)下的研究熱點(diǎn)。以來自于小菜蛾的特異性抗菌肽moricin為研究對象，研究其酵母異源表達(dá)水平和抑菌性能 及生化特性，為進(jìn)一步的開發(fā)利用提供理論支持。根據(jù)已有的小菜蛾抗菌肽moricin特異性基因信息，采用聚合酶 鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增其成熟肽基因mor-3，并克隆至pGAPZα A質(zhì)粒中，構(gòu)建組成型分泌表達(dá)載體pGAPZα A-mor3，線性化 片段電轉(zhuǎn)化導(dǎo)入畢赤酵母SMD1168菌株，高質(zhì)量濃度Zeocin篩選獲得高拷貝重組轉(zhuǎn)化子。以YPD為培養(yǎng)基進(jìn)行搖瓶 發(fā)酵，重組蛋白獲得高效表達(dá)，分子質(zhì)量約為5 kD，與理論預(yù)測的基本一致；發(fā)酵60 h，上清液中重組蛋白表達(dá)量 達(dá)248.98 mg/L，而且耐熱性能良好，同時具備較強(qiáng)的耐強(qiáng)酸及強(qiáng)堿的能力，特別在強(qiáng)酸環(huán)境中活性保持穩(wěn)定，體 現(xiàn)了較好的機(jī)體內(nèi)環(huán)境的適應(yīng)性潛力；對部分革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均具有抑菌作用，特別是對革蘭氏陰性 菌具備特異性較強(qiáng)的抑制作用，對大腸桿菌的最低抑菌濃度為6.25 μg/mL，而對金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度僅 為124.49 μg/mL。獨(dú)特的抑菌性能和理化特點(diǎn)，使其具備廣闊的開發(fā)應(yīng)用前景及良好的社會與環(huán)保效益。
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