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紅鰭東方鲀組織蛋白酶L表達載體的構(gòu)建及表達結(jié)果驗證
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 135 發(fā)表時間: 2017-10-10
作者: 李妍鈺,湯奇龍,張魯嘉,謝靜莉,王文利,劉源
關(guān)鍵詞: 紅鰭東方鲀;組織蛋白酶L;呈味肽;大腸桿菌表達系統(tǒng)
摘要:

紅鰭東方鲀味道鮮美,已從其體內(nèi)發(fā)掘了系列鮮味肽,但其形成機制尚未明確。組織蛋白酶L可通過降解肌原纖維蛋白及肌鈣蛋白發(fā)揮著重要的滋味形成作用。為了探索其對紅鰭東方鲀呈味肽的形成機制,本研究通過查找NCBI數(shù)據(jù)庫得到一條全長為1?336?bp的紅鰭東方鲀組織蛋白酶L的序列,從紅鰭東方鲀肌肉中提取RNA并轉(zhuǎn)錄為cDNA作為模板克隆,選擇pET-28a(+)作為表達載體、E. coli BL21作為重組工程菌進行克隆表達,成功得到大小為36?kD的重組組織蛋白酶L,并驗證了其可在大腸桿菌表達系統(tǒng)中成功克隆表達。本研究為進一步研究紅鰭東方鲀組織蛋白酶L酶學(xué)特性及其對滋味形成提供了理論支持。

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